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液相分析常見問題⑥ 峰麵積變來變去無法定量
發布時間:2019-07-22   點擊次數:142次


峰麵積是定量分析的基礎,峰麵積的變化會導致精密度、標曲、定量分析等一係列問題

 

那麽,如果遇到峰麵積不穩定的情況,ag8环亚要怎麽辦?讓ag8环亚分三種情況分別來看一看:

 

一、峰麵積變小

 

1. 儀器漏液

儀器漏液會導致樣品損失,與正常測定結果相比,會出現色譜峰減小的情況。

→這種時候,需要檢查係統壓力,確保所有螺絲或連接處無漏液情況,排查儀器方麵的原因。

 

2. 樣品穩定性不好

有些樣品自身穩定性不好,配置後,隨著進樣時間的推移會出現降解現象。

→如果連續進樣過程中,主峰的峰麵積減小,同時伴隨雜質峰麵積增加的情況,建議確認樣品在溶劑或流動相中的穩定性情況

 

3. 進樣瓶中樣品量過少

當樣品瓶中樣品過少可能導致進樣針未吸取到足夠樣品進樣。

添加樣品或使用內襯管即可解決。

 

4. 第一針峰麵積減小

進樣瓶的瓶蓋擰緊後,瓶內會出現負壓,可能導致進樣器取樣不準確。

→第二次進樣時,由於瓶蓋已經有孔,負壓消除後進樣峰麵積會恢複正常;也可通過使用預開口進樣小瓶來解決該類問題。

 

二、峰麵積變大

 

可能是由於色譜柱或流動相條件導致樣品吸附,特別是一些帶電荷情況較為複雜的蛋白或多肽類樣品。

→大濃度進樣、平衡可能的吸附位點

更換色譜柱優化方法

(推薦更換MG、MGII、或Proteonavi進行嚐試)

 

▲CAPCELL PAK 聚合物包被結構示意圖

 

Proteonavi

 

Proteonavi是采用在多孔球形矽膠填料表麵鍵合丁基(C4的高性能蛋白質•多肽分析專用色譜柱。該填料既具有矽膠類填料的高分離能力耐壓性,又具有耐酸性抑製蛋白質吸附等特長。

 

★ 具備優越的耐酸性

★ 填料表麵的蛋白吸附極低,即使樣品量少也能被檢出

★ 可對應從分析到製備的規模擴大化

 

三、峰麵積忽大忽小,變化無規律

 

1. 自動進樣器故障或混入氣泡

→進樣過程中,觀察進樣針中無氣泡混入,如果自動進樣器出現故障,需要谘詢相應品牌儀器工程師。

 

2. 樣品過於黏稠會導致進樣不準確

稀釋樣品通常可以解決

 

3. 進樣瓶中混入氣泡

→部分樣品容易混入氣泡,比如一些表麵活性劑類樣品,觀察進樣瓶中是否有小氣泡,或者對進樣瓶進行超聲脫氣

 

PS: 以上對策主要針對液相分析檢測中出現峰麵積不穩的情況,如果在質譜分析中出現峰麵積不穩,則可能會有離子化、基質效應等其他原因。

 

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