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快速分析中色譜柱的選擇 係列攻略第一彈:關於粒徑
發布時間:2019-08-08   點擊次數:81次


近年來,在液相色譜分析領域,“快速分析”的話題越來越多被提起。而在2020年版《中國藥典編製大綱》中,也提到“積極倡導綠色標準和經濟標準,推廣采用毒性小、汙染少、節約資源、保護環境、簡便實用的檢測方法”。

 

“快速分析”能帶來的好處有很多方麵,例如,方法開發階段,提高分析速度可以節約分析時間;還可以節約有機溶劑、降低成本、保護環境,等等。

 

那麽,當ag8环亚談論快速分析時,ag8环亚在談論什麽?

 

快速分析的目的

 

● 增加每天所能分析的樣品數量(早點下班!)

● 謀求更高分離度(早點下班!)

● 節約溶劑,降低成本、保護環境(省錢!)

● 減少分析時間過長的項目耗時(早點下班!)

 

想要達成以上目的,可以通過提高流速、縮短色譜柱長度和內徑等方法進行分析調整。但是,如果直接縮短柱長或提高流速,可能會對分離造成不良影響,或使目標化合物無法溶出、洗脫。反過來說,選擇分離能力強的色譜柱非常關鍵。

 

 

那麽,分離能力受哪些因素影響呢?說起背後的原理和實際操作之間的聯係,一篇文章可說不完~

 

因此,ag8环亚又開了新的液相豆丁帖——快速分析中色譜柱的選擇係列攻略,希望能在結合實際操作的同時,和大家一起探討色譜分析背後的奇妙原理~

 

那麽,今天將對快速分析時的關鍵因素——粒徑進行介紹~

01

粒徑

理論塔板數 N(柱效)= L / H

柱效下降,分離變差

為保證分離,應選用小粒徑

(3 μm、2 μm)

 

 

Van Deemter方程

範德姆特方程ag8环亚都很熟悉了:

 

H =  A + B/u + Cu

 

A  : 渦流擴散項

      ▷由粒徑大小決定

B/u  : 縱向擴散項

      ▷流速越小數值越大

Cu:傳質阻力項

      ▷與粒徑大小和流速有關

 

 

相比5 μm柱,3 μm和2 μm柱:

 

▷在同等流速下,理論塔板高度更小

(同等柱長,柱效更高)

▷即使在更高流速下,也能保持較低理論塔板高度

(高流速下,也能得到高柱效)

 

粒徑與柱長

樣品:

①地昔帕明  ②丙咪嗪  ③地昔帕明  ④阿米替林  ⑤三甲丙咪嗪

 

如上圖,分別使用不同粒徑、不同柱長的IF(S2)和兩款MGIII(S3和S5)色譜柱,對5種抗抑鬱藥進行了分析。

 

可以看出,當粒徑由5 μm變為3 μm、3 μm變為2 μm時,分別對應150 mm、100 mm和50 mm長度的色譜柱,最終,在同等理論塔板數的前提下,分析時間大幅縮短。

 

也就是說:小粒徑色譜柱能得到更尖銳的峰形和更高的理論塔板數;縮短色譜柱長度,可相應縮短分析時間。

 

那麽,柱長和粒徑之間的換算關係如何呢?

 

分離效率:L / Dp

 

L / Dp =  50000為前提,

250 mm L,5 μm

150 mm L, 3 μm

or

100 mm L, 2 μm

因此,為保證分離

在縮短柱長的同時,應選用小粒徑柱

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